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HPLC是什么?它的实验流程有哪些?

? HPLC是高效液相色谱法英文的全称,它是色谱法中的一个重要分支,主要是将流动属相的液体放在高压输液系统之中…

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HPLC是高效液相色谱法英文的全称,它是色谱法中的一个重要分支,主要是将流动属相的液体放在高压输液系统之中,配合不同极性的溶剂通过流动相泵装在固定相的色谱柱中。通过色谱柱对液体进行分离检测,达到对液体样本的分析。目前,这项分离技术广泛运用在化学、医学、科学、农业等重要的科技领域之中。
HPLC按照原理可以分为正/反相色谱、离子交换色谱、空间排斥色谱、假相色谱、亲和色谱、手性色谱、毛细管电泳等。目前最为常见的分离方式有蒸馏、离心、电泳、过滤和超滤这几种。根据这些分离的方式,高效液相色谱仪由检测系统、输液系统、进样系统、分离系统、数据记录和处理系统等组成而成。
在对样品的检验之中,每一个环节都非常的重要,它将会直接影响检测的最终结果。那使用液相色谱仪的实验流程有哪些?
第一,准备好流动相的样本,对检验的样本进行文献调研从而了解样品的特性以及检测的条件,对样品进行处理。
第二,开机使用色谱仪之前对每一个部件进行检测,检查部件连接是否完成,并开启仪器的每个部件的电源,等待设备自检通过后,对样品进行溶解。这个溶解包括检测样品的过滤和配合适合的标准溶液。
第三,安装相应的色谱柱,对泵进行相关的操作,排出管路中的气体,这样流动相才能充满管路。色谱启动后在系统内会进行分析过程,验证色谱条件并绘制标准的曲线,进行相关的数据处理。处理结果则会呈现在电脑之中。
第四,每一个使用完色谱仪后需要对泵进行清洁处理,对于进液处的砂芯过滤头要进行清洗,避免攒积杂质和沉淀,最终导致泵内堵塞或者出现气泡等问题。每一次分析结束后都要对进样口进行冲洗,这样才不会导致下次检测出现样品交叉污染的情况

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作者: 卡奇

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